蜂王浆（RJ）是蜜蜂（ApismelliferaL.）下咽腺和下颌腺分泌的一种乳脂状浆状物质。它具有多种药理和营养特性，如抗疲劳、抗菌、抗氧化、抗衰老、延长寿命、抗炎、抗肿瘤、增强免疫活性和改善高血糖症等。事实上，RJ作为医疗产品和功能性食品已经在全球范围内使用多年。
蜂王浆由蛋白质、糖类、脂类、维生素和游离氨基酸等组成。其中，蛋白质是RJ的主要成分，占其干物质的近50%。对RJ蛋白质的分析表明，82%～90%（m/m）是由主要RJ蛋白质（MRJPs）构成的。MRJP家族属于糖基化蛋白，由9个成员组成，分子量为49～87kD，是RJ生理活动的主要因子。MRJP1（royalactin）被证明是蜜蜂种性分化的关键因子，同时也具有类似生长因子的活性，包括促进大鼠肝细胞的DNA合成、增殖和抑制细胞凋亡。
雌激素通过雌激素受体（ER）在包括女性和男性生殖系统在内的许多目标的生长、分化和功能中发挥着重要作用。先前的研究表明，RJ可以表现出微弱的雌激素样作用。从RJ中分离出的三种脂肪酸（10-羟基-反式-2-癸烯酸（10-HDA）、10-羟基癸烯酸和反式-2-癸烯酸）和一种甾醇-24-亚甲基胆固醇在未成熟大鼠中表现出雌激素活性。RJ能促进卵巢卵泡发育，增加未成熟大鼠的类固醇激素。RJ处理使卵母细胞和核成熟率、受精率和囊胚形成率显著提高。MRJP1能诱导幼虫发育为蜂后，增加蜜蜂体型和卵巢发育，这说明该蛋白具有类似雌激素的作用。
蜂王浆的雌激素作用不是由于RJ本身的性激素，而是其有效成分。近年来，研究人员探索了一种以新鲜RJ为原料，利用超滤设备制备冻干MRJPs粉的新技术，以保留新鲜RJ的活性。冻干后的MRJPs保留了RJ的生物功能，并在室温下保持稳定。研究表明，MRJPs具有延长果蝇寿命、提高进食量和繁殖力的功能。然而，MRJPs对哺乳动物生殖功能的作用机制仍不清楚。
MRJPs（蜂王浆主蛋白）可能通过改变激素分泌或含有激素类化合物来发挥生殖功能。因此，浙江大学的XinLiu、LirongShen等在本研究中旨在评价MRJPs对未成熟雌性小鼠青春期开始和卵巢卵泡发育的影响。
Results未成熟的雌性ICR小鼠分别通过口服途径接受不同剂量的冻干MRJPs粉末：mg/kg体重（M）、mg/kg体重（M）和mg/kg体重（M）。MRJPs对卵巢指数和子宫指数的影响
补充MRJPs对第45天雌性小鼠卵巢指数（OI）和子宫指数（UI）的影响如图1所示。M、M和M的OI分别为0.71、0.74和0.57mg/g，与对照组（CK）（0.56mg/g）相比，分别增加了26.8%（P＝0.）、32.1%（P＝0.027）和1.7%（P＝0.）。与CK相比，M中的OI显著增加，充当了较好的MRJPs剂量。M、M和M的UI分别为2.94、3.19和2.89mg/g，与CK（2.82mg/g）相比，分别增加了4.3%（P＝0.）、13.1%（P＝0.）和2.5%（P＝0.）。与CK相比，M中的UI显著增加，充当了最佳MRJPs。A.OI直方图；B.UI直方图。
图1MRJPs治疗对OI和UI的影响
MRJPs对青春期的影响
为了确定青春期的开始，从产后第24天到第35天检查阴道口打开（VO）时间（图2）。M组的第一次VO发生在PND26。经鉴定，M、M和M的VO天数分别为28.3、26.8和28.3天，与CK（31.7天）相比分别加快了10.7%、15.5%和10.7%（P＜0.01）。结果表明，补充MRJPs可以加速雌性小鼠青春期的到来。图2补充MRJPs对雌性小鼠青春期开始的影响
MRJPs对卵巢卵泡的影响
HE染色后可见小鼠卵巢中的典型形态如图3所示。形态学评价比较各组小鼠卵巢切片中原始卵泡（PFⅠ）、初级卵泡（PFⅡ）、次级卵泡（SF）和Graffian卵泡（GF）的结构。所有MRJPs处理组卵巢的完整性均保存良好，与CK组相似。形态学上正常卵泡的特征是圆形或椭圆形卵母细胞，呈现出一个界限分明的核，染色质未凝结，周围有健康的颗粒细胞与卵母细胞紧密并列。在高剂量MRJPs治疗中观察到了多卵母细胞卵泡（MOFs），即一个卵泡有两个或多个卵母细胞（图3D）。A.对照组卵巢；B.M处理；C.M处理；D.M处理。
图3未成熟雌性小鼠中卵巢问题的代表性光学显微镜图像
然后，研究比较了各组卵巢卵泡的数量（图4）。结果显示，与CK相比，补充MRJPs可使PFⅠ、PFⅡ显著下降，SF和GraffianGF增加（P＜0.）。M、M、M的SF分别为10.75、12.75、9.88，与CK（7.13）相比，分别增加了50.7%（P＝0.）、78.8%（P＝0.）和38.6%（P＝0.)，分别比CK（0.50）增加.0%、.0%和.0%（P＜0.），M和M和M的平均GF分别为3.50、4.37和1.25，分别比CK（0.50）增加.0%、.0%和.0%。图4不同组PFⅠ，PFⅡ，SF和GF数量的比较
MRJPs对血清激素水平的影响
为了确定补充MRJPs是否会影响雌性小鼠的卵巢激素，对其血清雌二醇（E2）和孕酮（P）水平进行了检测。如图5A所示，M、M和M的血清E2水平分别为（25.16±2.86）、（28.19±2.03）和（22.42±1.74）pg/mL，与CK（（17.1±0.78）pg/mL）相比，分别显著升高47.1%、64.9%和31.3%（P＜0.）。如图4B所示，M、M和M的血清P水平分别为（7.21±2.68）、（13.59±3.82）和（6.90±1.90）ng/mL，与CK（（6.35±2.28）ng/mL）相比，分别显著升高13.5%（P＝0.）、.0%（P＝0.）和8.7%（P＝0.）。与CK相比，M的血清P浓度显著增加（P＝0.）（图5B）。结果表明，补充MRJPs可以刺激卵巢类固醇的分泌，M是MRJPs的最佳效益补充剂量。A.血清E2水平；B.血清P水平。
图5MRJPs对雌性小鼠血清激素水平的影响
补充MRJPs对激素受体基因表达的影响
为了研究MRJPs促进卵泡发育的作用分子机制，分别测定了代表性基因ERα和ERβ的变化，图6描述了两种基因的相对表达情况。结果显示，补充MRJPs对ERα的表达无明显影响（P＝0.），但喂养MRJPs的雌性小鼠各处理中ERβ的表达量均较CK显著增加（P＜0.），说明补充MRJPs主要通过上调ERβ基因的表达来提高激素分泌水平，促进卵巢发育。A.ERαmRNA表达；B.ERβmRNA表达
图6MRJPs对卵巢中ERα和ERβmRNA表达的影响
补充MRJPs对卵巢抗氧化性的影响
表1显示了MRJPs对抗氧化活性的影响。鉴于MDA是脂质过氧化和氧化损伤的指标，本研究评估了卵巢问题的MDA水平。与CK相比，M和M组的MDA水平分别降低了24.6%（P＝0.）和26.74%（P＝0.）。然而，M和M中SOD的活性与CK相比分别增加了11.33%（P＝0.）和18.14%（P＝0.），表现出显著差异。同样，M和M的GSH-Px活性分别比CK提高了19.19%（P＝0.）和19.6%（P＝0.），明显高于CK。表1补充MRJP对抗氧化性能的影响
Conclusion综上所述，补充蜂王浆主蛋白可加速青春期的到来，促进未成熟雌性小鼠的卵泡发育。蜂王浆主蛋白对生殖性能的促进作用与提高雌激素活性和生殖系统的抗氧化潜力、上调ERβ基因的表达，以提高激素分泌和促进雌性小鼠卵巢发育有关。本研究为从RJ中提取的蜂王浆主蛋白可能是一种新的潜在的促进生育参数的补充蛋白提供了新的证据，补充蜂王浆主蛋白可能是未来治疗不孕不育的一种有效方法。（来源：食品科学杂志）
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